荧光素漏出试验（FLT）是近年发展的用于替代兔眼刺激试验的体外检测方法，通过测量受试物处理后单层或多层细胞中荧光素的渗透量，评估其对眼部的刺激性及细胞屏障功能的损伤程度。该方法基于角膜上皮屏障原理，利用体外培养的贴壁细胞模拟角膜结构，通过荧光分光光度计测定荧光素漏出百分比（FL%），其中以4小时检测值FL20H4作为刺激性分级标准 ，在欧洲获得了广泛的验证研究，被学界认为是一种极具意义的替代检测方法。
实验中，荧光素漏出量计算公式为FL(%)=(m-y)/(z-y)×100%，并根据FL20H4将刺激性划分为三个等级：＞10 g/100 ml为无/轻刺激，2~10 g/100 ml为中刺激 。2007年杨光宇等人通过对比26种阳性物和20种化妆品的FLT与Draize试验结果，证实两者分级具有高度一致性（kappa值0.827和0.571，P0.001） 。2013年研究进一步验证FLT在化妆品检测中筛选重度刺激物的有效性，其分级与《化妆品卫生规范》家兔试验标准存在相关性 。
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